Microscopia

28-Octubre- 2014

El microscopio (del griego micrós, ‘pequeño’, y scopéo, ‘mirar’)¹ es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeños para ser vistos a simple vista. El tipo más común y el primero que se inventó es el microscopio óptico. Se trata de un instrumento óptico que contiene dos o más lentes que permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por refracción. La ciencia que investiga los objetos pequeños utilizando este instrumento se llama microscopia


Partes del microscopio:

• Oculares: Están colocados en la parte superior del tubo, su función es la de captar y ampliar la imagen formada en los objetivos.
• Tubo: Es una cámara obscura unida al brazo mediante una cremallera.
• Brazo: Es una columna perpendicular al pie. puede ser arqueado o vertical y une al pie con el tubo
• Objetivos: Están colocados en la parte inferior del tubo insertadas en una pieza metálica denominada revolver que permite cambiarlos fácilmente. Generan una imagen real, invertida y aumenteada
• Platina: Es una plataforma horizontal con un orificio central, sobre el que se coloca la preparación, que permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminación situada por debajo
• Pinzas: Se encuentran en la platina y sirven para retener el porta objetos sobre la platina
• Tornillos de desplazamiento: permite mover la preparación de adelante hacia atrás o de izquierda a derecha 
• Nonius: Permite fijar las coordenadas de cualquier campo óptico
•  condensador:Es un sistema de lentes situado debajo de la platina su función es concentrar la luz generada por la fuente de iluminación hacia la preparación
• Diafragma iris: Su función es limitas los rayos que atraviesan el sistema de lentes eliminando los rayos demasiado desviados.
• Fuente de iluminación: Se trata de una lampara alógena de intensidad graduable. Esta situada en el pie del microscopio
• Pie: Sirve como base del microscopio y tiene un peso suficiente para dar estabilidad al aparato. En el se integra la fuente luminosa.
• Tornillo macrométrico y micrométrico: Son tornillos de enfoque, mueven la platina hacia arriba y hacia abajo. El macrométrico lo hace de forma rapida y el micrométrico de forma lenta.

Fig. 1 Partes del microscopio

Manejo del microscopio

Enfoque

1. Colocamos el preparado en la platina 
2. Conectamos el microscopio 
3. Observamos que la luz este al mínimo
4. Encendemos el microscopio 
5. Colocamos el preparado en la platina
6. Encendemos el reostato
7. Movemos la platina 
8. Colocamos los ojos en los oculares 
9. Regular la platina hasta encontrar la imagen siempre usando el tornillo macrometrico
10. Cuando veamos la mancha mas clara mover con el tornillo micrometrico 
11. Regular los revolver

Desenfoque 

1. Poner el eje óptico mas pequeño
2. Bajar platina con tornillo macrometrico.
3. Quitar la sustancia de la platina 
4. Limpiar el cubre objetos con alcohol
5. Bajar el reostato
6. Apagar y desenfocar
7. Poner el enfoque mas pequeño y subir la platina 

Tipos de extendido 

Permanente:

1. En el porta objetos en la parte de atrás se dibuja un circulo mas pequeño que el cubre objetos, este nos servirá para que cuando queramos ponerle el silicón no quede de fuera la muestra.
2. En la parte de adelante ponemos la muestra con ayuda de unas pinzas o de una asa de platino sin que nos salgamos de el circulo
3. La muestra debe ser demasiado fina para que así la podamos observar con mayor facilidad en el microscopio y para que en el momento de ponerle el cubre objeto no quede aire en el.
4. Ponemos silicón al rededor de la muestra y ponemos el porta objetos aplastandolo con el asa tratando de que no quede aire en el  

Temporal: 

1. Ponemos una muestra muy pequeña y delgada en el porta objetos procurando de que sea mas pequeña la muestra que el cubre objetos.
2. en caso de que sea un extendido procurar que sea demasiado delgado y lo extendemos con el asa y en caso de que sea solido cortar una caja demasiado fina y ponerla en el portaobjetos con una pinza
3. Se coloca una gota de agua y se pone encima el cubre objetos 
4. Se lleva a observar y cundo acabemos desechar la muestra y limpiarla con alcohol.

Tipos de Tinciones 

Tinción de Gram: La tinción de Gram o coloración de Gram es un tipo de tinción diferencial empleado en bacteriología para la visualización de bacterias, sobre todo en muestras clínicas. Debe su nombre al bacteriólogo danés Chhristian Gram (1853-1938), que desarrolló la técnica en 1884. Se utiliza tanto para poder referirse a la morfología celular bacteriana, como para poder realizar una primera aproximación a la diferenciación bacteriana, considerándose bacterias gram positivas a las que se visualizan de color morado, y bacterias gram negativas a las que se visualizan de color rosa, rojo o grosella. 

Aqui lñes dejo un pagina donde pueden ver de que trata la Tinción de Gram

Tinción Simple:  Se aplica un unico colorante , proporciona información a cerca de la forma tamaño y tipo de agrupación de los organismos. Aquí les dejo una pagina para poder observar bien como se hace la Tinción Simple

Fig. 2. observando una capa fina de cebolla con el ocular 100x

fig. 3.  preparando frotis con crema

Fig. 4. tinción simple de crema

Fig. 5. observando frotis de crema y vemos un lado que esta teñido y el otro no

Fig. 6. Observando cascara de tomate con el objetivo 4x

Fig. 7. Haciendo frotis temporal con espinaca

Fig. 8. Observando frotis de espinaca con el objetivo 100x